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常見(jiàn)問(wèn)題

common problem
關(guān)于PCR假陰性問(wèn)題的總結(jié)

PCR的假陽(yáng)性問(wèn)題深受重視,但PCR假陰性問(wèn)題相對(duì)于臨床檢測(cè)更為嚴(yán)重。就PCR假陽(yáng)性的問(wèn)題來(lái)說(shuō),一般僅涉及污染和引物的非特異性問(wèn)題。而污染可以通過(guò)嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室管理,合理的環(huán)境設(shè)置,以及加入U(xiǎn)NG酶抗污染基本可以解決,而引物的非特異性問(wèn)題基本屬于廠(chǎng)家試劑質(zhì)量問(wèn)題。而PCR的假陰性卻不同,它涉及了與PCR實(shí)驗(yàn)的幾乎所有人員和技術(shù)環(huán)節(jié),十分復(fù)雜。就臨床而言,大三陽(yáng)檢出率低、甚至檢測(cè)PCR仍為陰性的事情也經(jīng)常發(fā)生,可見(jiàn)假陰性問(wèn)題的嚴(yán)重性。


就PCR假陰性問(wèn)題總體來(lái)說(shuō)有如下因素:

一、 儀器因素

PCR實(shí)驗(yàn)對(duì)儀器的依賴(lài)性是很高的,離心機(jī)、擴(kuò)增儀都是造成PCR假陰性的因素。擴(kuò)增儀的主要問(wèn)題是孔間差,引起擴(kuò)增失敗可擴(kuò)增效率降低。而離心機(jī)的影響則更容易被忽視。國(guó)內(nèi)使用離心機(jī)很少使用離心加速度(XXXg)作為參數(shù)指標(biāo),而常使用轉(zhuǎn)數(shù)作為參數(shù)指標(biāo),這里就存在著一個(gè)問(wèn)題,由于離心機(jī)的大小不同,有效跳心半徑也不相同,因此同樣的轉(zhuǎn)速所產(chǎn)生的離心力相差很大(有的在數(shù)倍以上),所以在相同的離心時(shí)間下,有可能模板并沒(méi)有離心下來(lái),造成PCR假陰性。這個(gè)問(wèn)題在其他實(shí)驗(yàn)也有,但因基他實(shí)驗(yàn)都是測(cè)定大分子蛋白沉淀,對(duì)離心的速度要求較低所以不太明顯。建議使用小型臺(tái)式離心機(jī)的實(shí)驗(yàn)要注意一下這個(gè)問(wèn)題。


二、 試劑質(zhì)量問(wèn)題

PCR實(shí)驗(yàn)的成功與否試劑的質(zhì)量至關(guān)重要,試劑的質(zhì)量問(wèn)題涉及多個(gè)方面:細(xì)胞的裂解;模板的抽提;引物位點(diǎn)的選擇;Taq酶的活性等等。其中任一環(huán)節(jié)出了問(wèn)題都會(huì)引起結(jié)果的假陰性。這些都是試劑質(zhì)量的問(wèn)題,因此選用高質(zhì)量的PCR試劑非常重要。


三、 核酸模板問(wèn)題

核酸模板質(zhì)量問(wèn)題是制約PCR重要的因素之一。核酸模板在擴(kuò)增區(qū)出現(xiàn)斷裂、蛋白粘附、空間位阻等模板質(zhì)量問(wèn)題都有可能引起擴(kuò)增失敗造成結(jié)果的假陰性或定量不準(zhǔn)確。由于無(wú)論什么提取方法都不可能得到完全理想化的核酸模板,因此核酸模板質(zhì)量雖然與試劑的質(zhì)量有關(guān),但它不可能由試劑質(zhì)量完全解決。

核酸模板問(wèn)題除了模板本身的問(wèn)題外,還存在模板溶液中抑制Taq酶活性成分(如某些蛋白、離子等)作用,而導(dǎo)致擴(kuò)增效率降低甚至擴(kuò)增失敗的問(wèn)題。對(duì)此,有人提倡進(jìn)行模板純化,效果較為明顯。但另一個(gè)問(wèn)題又出現(xiàn)了,那就是怎樣保證純化的回收率問(wèn)題??傊?,核酸模板問(wèn)題是不可避免的問(wèn)題,只能努力去減少。


四、 操作人員素質(zhì)問(wèn)題

PCR實(shí)驗(yàn)的環(huán)節(jié)很多,而且對(duì)每一環(huán)節(jié)的質(zhì)量要求都很高,例如少加、漏加試劑、離心不充分、循環(huán)參數(shù)設(shè)計(jì)錯(cuò)誤、對(duì)于RNA抽提降解、逆轉(zhuǎn)錄失敗等等都能造成結(jié)果的假陰性。因此要求PCR的實(shí)驗(yàn)操作人員有很好的素質(zhì),能夠嚴(yán)格遵守操作規(guī)程,并能敏銳的發(fā)現(xiàn)問(wèn)題和解決問(wèn)題。


五、 其他

PCR實(shí)驗(yàn)中從樣品的采集、運(yùn)輸、保存開(kāi)始就可以引起結(jié)果的假陰性,而對(duì)于病原體檢測(cè)(如HBV)在人體血液系統(tǒng)出現(xiàn)有周期性變化也是值得注意的因素。


核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室防污染策略

PCR反應(yīng)的特點(diǎn)是具有較大擴(kuò)增能力與極高的靈敏性,但令人頭痛的問(wèn)題是易污染,極其微量的污染即可造成假陽(yáng)性的產(chǎn)生。

污染原因

一、標(biāo)本間交叉污染:

標(biāo)本污染主要有收集標(biāo)本的容器被污染,或標(biāo)本放置時(shí),由于密封不嚴(yán)溢于容器外,或容器外粘有標(biāo)本而造成相互間交叉污染;標(biāo)本核酸模板在提取過(guò)程中,由于吸樣槍污染導(dǎo)致標(biāo)本間污染;病毒樣本可隨氣溶膠或形成氣溶膠而擴(kuò)散,導(dǎo)致彼此間的污染。

二、PCR試劑的污染:

主要是由于在PCR試劑配制過(guò)程中,由于加樣槍、容器、雙蒸水及其它溶液被PCR核酸模板污染。

三、PCR擴(kuò)增產(chǎn)物污染:

這是PCR反應(yīng)中主要常見(jiàn)的污染問(wèn)題。因?yàn)镻CR產(chǎn)物拷貝量大(一般為1013拷貝/ml),遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于PCR檢測(cè)數(shù)個(gè)拷貝的檢出限,所以極微量的PCR產(chǎn)物污染,就可造成假陽(yáng)性。

還有一種容易忽視,可能造成PCR產(chǎn)物污染的形式是氣溶膠污染。在空氣與液體面摩擦?xí)r就可形成氣溶膠,在操作時(shí)比較劇烈地?fù)u動(dòng)反應(yīng)管,開(kāi)蓋時(shí)、吸樣時(shí)及污染進(jìn)樣槍的反復(fù)吸樣都可形成氣溶膠而污染。據(jù)計(jì)算一個(gè)氣溶膠顆??珊?8000拷貝,因而由其造成的污染是一個(gè)值得特別重視的問(wèn)題。

四、實(shí)驗(yàn)室中克隆質(zhì)粒的污染:

在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室及某些用克隆質(zhì)粒做陽(yáng)性對(duì)照或其他陽(yáng)性樣品的檢驗(yàn)室,這個(gè)問(wèn)題也比較常見(jiàn),其污染可能性也很大。


污染的監(jiān)測(cè)

一個(gè)好的PCR實(shí)驗(yàn)室,要時(shí)刻注意污染的監(jiān)測(cè),考慮有無(wú)污染是什么原因造成的污染,以便采取措施,防止和消除污染。

對(duì)照試驗(yàn):

一、陽(yáng)性對(duì)照:

建立PCR實(shí)驗(yàn)室都應(yīng)設(shè)有PCR陽(yáng)性對(duì)照,它是PCR反應(yīng)是否成功、是否合乎理論要求的一個(gè)重要的參考標(biāo)志。陽(yáng)性對(duì)照要選擇擴(kuò)增度中等、重復(fù)性好,經(jīng)各種鑒定是該產(chǎn)物的標(biāo)本,如以重組質(zhì)粒為陽(yáng)性對(duì)照,其含量宜低不宜高(100個(gè)拷貝以下)。但陽(yáng)性對(duì)照尤其是重組質(zhì)粒及高濃度陽(yáng)性標(biāo)本,其對(duì)檢測(cè)或擴(kuò)增樣品污染的可能性很大。因而當(dāng)某一PCR試劑經(jīng)自己使用穩(wěn)定,檢驗(yàn)人員心中有數(shù)時(shí),在以后的實(shí)驗(yàn)中可免設(shè)強(qiáng)陽(yáng)性對(duì)照,以弱陽(yáng)性對(duì)照能為可能的低濃度病毒樣本把關(guān)。另外,條件成熟的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)選用第三方如衛(wèi)生部臨檢中心提供的室內(nèi)質(zhì)控品陽(yáng)性參考品來(lái)監(jiān)測(cè)整個(gè)反應(yīng)體系。

二、陰性對(duì)照:

以已知陰性血清為陰性對(duì)照,有條件的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)選用第三方如衛(wèi)生部臨檢中心提供的室內(nèi)質(zhì)控品陰性參考品來(lái)監(jiān)測(cè)整個(gè)反應(yīng)體系。

 

三、重復(fù)性試驗(yàn)。

防止污染的方法

一、 污染的預(yù)防

進(jìn)行PCR操作時(shí),操作人員應(yīng)該嚴(yán)格遵一些操作規(guī)程,程度地降低可能出現(xiàn)的PCR污染或杜絕污染的出現(xiàn)。

1.劃分操作區(qū):目前,普通PCR尚不能做到單人單管,實(shí)現(xiàn)完全閉管操作,但無(wú)論是否能夠達(dá)到單人單管,均要求實(shí)驗(yàn)操作在三個(gè)不同的區(qū)域內(nèi)進(jìn)行,PCR的前處理和后處理要在不同的隔離區(qū)內(nèi)進(jìn)行:

(1)試劑準(zhǔn)備區(qū),包括反應(yīng)液的配制和試劑耗材的儲(chǔ)存等。

(2)標(biāo)本處理區(qū),包括標(biāo)本的接收、處理以及擴(kuò)增摸板的制備。

(3)擴(kuò)增檢測(cè)區(qū),包括PCR擴(kuò)增檢測(cè)、結(jié)果分析和報(bào)告的發(fā)放。

(4)各工作區(qū)要有一定的隔離,操作器材專(zhuān)用,要有一定的方向性。實(shí)驗(yàn)室人員和物品的工作流向應(yīng)為試劑耗材儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本處理混樣區(qū)→樣本制備(核酸純化)區(qū)→擴(kuò)增檢測(cè)區(qū),不得逆向流動(dòng)。

(5)實(shí)驗(yàn)用品包括實(shí)驗(yàn)材料(試劑、標(biāo)本和耗材等)、實(shí)驗(yàn)器材(包括容器、板架、實(shí)驗(yàn)服、帽子、口罩、手套、鞋套等)、辦公用品(各類(lèi)文件、記錄紙、筆等)以及清潔用具等,為便于鑒別,不同的工作區(qū)域應(yīng)使用不同顏色或有明顯區(qū)別標(biāo)志的工作服。當(dāng)工作者離開(kāi)工作區(qū)時(shí),不得將各區(qū)特定的工作服帶出。  

(6)清潔方法不當(dāng)也是污染發(fā)生的一個(gè)重要原因,因此實(shí)驗(yàn)室的清潔應(yīng)按試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)至擴(kuò)增檢測(cè)區(qū)的方向進(jìn)行。不同的實(shí)驗(yàn)區(qū)域應(yīng)使用其各自的清潔用具以防止交叉污染。

 

2.分裝和配置試劑:核酸提取PCR擴(kuò)增所需要的試劑均應(yīng)在裝有紫外燈的超凈工作臺(tái)或負(fù)壓工作臺(tái)(生物安全柜)配制和分裝。所有的加樣器和吸頭需固定放于其中。

3. 實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng):盡管擴(kuò)增序列的殘留污染大部分是假陽(yáng)性反應(yīng)的原因,樣品間的交叉污染也是原因之一。因此,不僅要在進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)是謹(jǐn)慎認(rèn)真,在樣品的收集、提取和擴(kuò)增的所有環(huán)節(jié)都應(yīng)該注意:

(1)戴一次性手套,若不小心濺上反應(yīng)液或血清樣本,應(yīng)立即更換手套。

(2)使用一次性帶濾芯吸頭,嚴(yán)禁與PCR各區(qū)的吸頭混用,吸頭使用完畢后應(yīng)立即閉蓋,不要長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中,避免氣溶膠的污染。

(3)避免反應(yīng)液飛濺,打開(kāi)反應(yīng)管時(shí)為避免此種情況,開(kāi)蓋前稍離心收集液體于管底。若不小心濺到手套或桌面上,應(yīng)立刻更換手套并用10%次氯酸鈉擦拭桌面。

(4)操作多份樣品時(shí),應(yīng)事先做好標(biāo)記,然后開(kāi)始操作,這樣即可以減少操作,避免污染,又可以增加反應(yīng)的精確度。

(5加入樣本的反應(yīng)管應(yīng)配上蓋子并蓋緊。

(6)操作時(shí)設(shè)立陰陽(yáng)性對(duì)照,即可驗(yàn)證PCR反應(yīng)的可靠性,又可以協(xié)助判斷擴(kuò)增系統(tǒng)的可信性。

(7)盡可能使用可替換或可高壓處理的加樣器,由于加樣器容易受產(chǎn)物氣溶膠或標(biāo)本核酸的污染,好使用可替換或高壓處理的加樣器。如沒(méi)有這種特殊的加樣器,至少PCR操作過(guò)程中加樣器應(yīng)該專(zhuān)用,不能交叉使用。

(8)遇疑似樣本,進(jìn)行確認(rèn)實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)做重復(fù)或副孔實(shí)驗(yàn),驗(yàn)證結(jié)果,慎下結(jié)論。

4.進(jìn)行血液核酸檢測(cè)的人員須具有血液核酸檢測(cè)的培訓(xùn)合格證書(shū),并接受過(guò)實(shí)驗(yàn)室生物安全以及廠(chǎng)家的上崗前儀器設(shè)備操作、維護(hù)及校準(zhǔn)等的培訓(xùn)。

5.對(duì)實(shí)驗(yàn)室外來(lái)人員的控制,凡進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的人員,不論是參觀(guān)人員、進(jìn)修人員、施工工人等皆須遵守實(shí)驗(yàn)室規(guī)定,嚴(yán)格著裝防護(hù)服,并嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室流向制度。

6每一個(gè)核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室人員要具有區(qū)別于日常實(shí)驗(yàn)的強(qiáng)防污染意識(shí)。

二、污染源追蹤

如果不慎發(fā)生污染情況,應(yīng)從下面幾條出發(fā),逐一分析,排除污染。

1.試劑污染:
設(shè)立陰陽(yáng)性對(duì)照:有利于監(jiān)測(cè)反應(yīng)體系各成分的污染情況。選擇陽(yáng)性對(duì)照時(shí),應(yīng)選擇擴(kuò)增弱,且重復(fù)性好的樣品,因強(qiáng)陽(yáng)性對(duì)照可產(chǎn)生大量不必要的擴(kuò)增序列,反而可能成為潛在的污染源。如果擴(kuò)增結(jié)果中試劑對(duì)照為陽(yáng)性結(jié)果,就是某一種或數(shù)種試劑被污染了。此時(shí),要全部更換一批新的試劑進(jìn)行擴(kuò)增,擴(kuò)增時(shí)設(shè)立不同的反應(yīng)管,每一管含有一種被檢測(cè)試劑,在檢出污染試劑后,應(yīng)馬上逐一處理。

2.環(huán)境污染:
在排除試劑污染的可能性外,更換試劑后,若不久又發(fā)現(xiàn)試劑被污染了,如果預(yù)防措施比較嚴(yán)密,則考慮可能為環(huán)境污染。環(huán)境污染中常見(jiàn)的污染源主要有:

(1)核酸混樣及提取設(shè)備

(2)生物安全柜

(3)離心機(jī)

(4)冰箱門(mén)把手,冷凍架,門(mén)把手或?qū)嶒?yàn)臺(tái)面等。此時(shí)可用擦拭實(shí)驗(yàn)來(lái)查找可疑污染源:

(5)氣溶膠。

如果經(jīng)過(guò)上述追蹤實(shí)驗(yàn),仍不能查找到確切污染源,則污染可能是由空氣中PCR產(chǎn)物的氣溶膠造成的,此時(shí)就應(yīng)該徹底清潔實(shí)驗(yàn)室或更換實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所,若條件不允許,則重新設(shè)計(jì)新的引物(與原引物無(wú)相關(guān)性)。

三、污染處理

1.環(huán)境污染

(1)稀酸處理法:對(duì)可疑器具用1mol/L鹽酸擦拭或浸泡,使殘余DNA脫嘌呤。

(2)紫外照射(UV)法:紫外波長(zhǎng)(nm)一般選擇254/300nm,照射30min即可。需要注意的是,選擇UV作為消除殘留PCR產(chǎn)物污染時(shí),要考慮PCR產(chǎn)物的長(zhǎng)度與產(chǎn)物序列中堿基的分布,UV照射僅對(duì)500bp以上長(zhǎng)片段有效,對(duì)短片段效果不大。UV照射時(shí),PCR產(chǎn)物中嘧啶堿基會(huì)形成二聚體,這些二聚體可使延伸終止,但并不是DNA鏈中所有嘧啶均能形成二聚體,且UV照射還可使二聚體斷裂。形成二聚體的程度取決于UV波長(zhǎng),嘧啶二聚體的類(lèi)型及與二聚體位點(diǎn)相鄰核苷酸的序列。在受照射的長(zhǎng)DNA鏈上,形成二聚體缺陷的數(shù)量少于0.065/堿基,其他非二聚體的光照損傷(如環(huán)丁烷型嘧啶復(fù)合體,胸腺嘧啶乙二醇,DNA鏈間與鏈內(nèi)的交聯(lián)和DNA斷裂等)均可終止Taq DNA聚合酶的延伸。這些位點(diǎn)的數(shù)量與二聚體位點(diǎn)相當(dāng)。如果這些位點(diǎn)(0.13/堿基)在DNA分子上隨機(jī)分布,一個(gè)500bp片段的DNA分子鏈上將有32處損傷位點(diǎn),那么,105個(gè)這樣的分子中每個(gè)分子中會(huì)至少有一處損傷。相反,如果100bp的片段,每條鏈上僅有6處損傷,105個(gè)拷貝分子中將有許多分子沒(méi)有任何損傷。這就是UV照射有一定的片段長(zhǎng)度限制的原因。

2.反應(yīng)液污染

可采用下列方法之一處理:

(1)DNase I法:PCR混合液(未加模板和Taq聚合酶)加入0.5U DNase I,室溫反應(yīng)30 min后加熱滅活,然后加入模板和Taq聚合酶進(jìn)行正常PCR擴(kuò)增。該方法的優(yōu)點(diǎn)是不需要知道污染DNA的序列。

(2)內(nèi)切酶法:選擇識(shí)別4個(gè)堿基的內(nèi)切酶(如Msp I和Taq I等),可同時(shí)選擇幾種,以克服用一種酶只能識(shí)別特定序列的缺陷,室溫作用1h 后加熱滅活進(jìn)行PCR。

(3)紫外照射法:未加模板和Taq聚合酶的PCR混合液進(jìn)行紫外照射,注意事項(xiàng)與方法同上述UV照射法。

(4)g射線(xiàn)輻射法:1.5kGy的輻射可完全破壞0.1ng基因組DNA,2.0 kGy可破壞104拷貝的質(zhì)粒分子,4.0 kGy仍不影響PCR,但高于此限度會(huì)使PCR擴(kuò)增效率下降。引物可受照射而不影響PCR,g射線(xiàn)是通過(guò)水的離子化產(chǎn)生自由基來(lái)破壞DNA的。

3.尿嘧啶糖苷酶(UNG)法

由于UV照射的去污染作用對(duì)500bp以下的片段效果不好,而臨床用于檢測(cè)的PCR擴(kuò)增片段通常為300bp左右,因此UNG的預(yù)防作用日益受到重視和肯定。

(1)原理:在PCR產(chǎn)物或引物中用dU 代替dT.這種dU化的PCR產(chǎn)物與UNG一起孵育,因UDG可裂解尿嘧啶堿基和糖磷酸骨架間的N-糖基鍵,可除去dU而阻止TaqDNA聚合酶的延伸,從而失去被再擴(kuò)增的能力。UNG對(duì)不含dU的模板無(wú)任何影響。UNG可從單或雙鏈DNA中消除尿嘧啶,而對(duì)RNA中的尿嘧啶和單一尿嘧啶分子則無(wú)任何作用。

(2)dUTP法:用dUTP代替dTTP,使產(chǎn)物中摻入大量dU.在再次進(jìn)行PCR擴(kuò)增前,用UNG處理PCR混合液即可消除PCR產(chǎn)物的殘留污染。由于UNG在PCR循環(huán)中的變性一步便可被滅活,因此不會(huì)影響含dU的新的PCR產(chǎn)物。

(3)dU引物法:合成引物時(shí)以dU 代dT,這樣PCR產(chǎn)物中僅5ˊ端帶dU.UNG處理后,引物失去了結(jié)合位點(diǎn)而不能擴(kuò)增。對(duì)長(zhǎng)片段(1-2kb以上)的擴(kuò)增用dUTP法效率較用dTTP低,而用dU法就可克服這一缺點(diǎn)。dU引物好將dU設(shè)計(jì)在3ˊ端或近ˊ端。該法僅能用于引物以外試劑的處理。

(4)優(yōu)點(diǎn):可以去除任何來(lái)源的污染;UNG處理可以和PCR擴(kuò)增在同一個(gè)反應(yīng)管內(nèi)進(jìn)行;由于擴(kuò)增產(chǎn)物中有大量dU存在,可徹底消除污染源。

(5)需注意的是摻入dUTP的DNA不應(yīng)對(duì)產(chǎn)物的任何操作有影響,在進(jìn)行PCR產(chǎn)物克隆時(shí),應(yīng)該轉(zhuǎn)化UNG-(UNG缺陷)大腸桿菌受體菌,否則轉(zhuǎn)化產(chǎn)物會(huì)被受體菌UNG消化掉。

4、日常的去污染措施包括但不僅限下面幾種:

(1)用10%次氯酸鈉或75%乙醇清潔表面,包括實(shí)驗(yàn)操作臺(tái)(每日)、儲(chǔ)存冰箱(每周至少一次)、儀器表面(每日)等;

(2)試驗(yàn)后長(zhǎng)時(shí)間的紫外照射實(shí)驗(yàn)操作臺(tái)面和其他表面;1小時(shí)的移動(dòng)紫外車(chē)60-90CM照射臺(tái)面,4小時(shí)以上的固定紫外燈屋內(nèi)照射;

(3)可高壓的加樣器的高壓消毒;對(duì)剪刀、鑷子等用品的消毒(每周一次);

(4)實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)2小時(shí)以上(每日實(shí)驗(yàn)后),窗戶(hù)必須配置紗窗。

 

實(shí)驗(yàn)室發(fā)生核酸殘余污染的處理及驗(yàn)證原則

1. 終止實(shí)驗(yàn):
一旦發(fā)生污染后,圍繞實(shí)驗(yàn)室尋找污染源耗時(shí)且很繁瑣,所以防止污染重在預(yù)防。但如果發(fā)生了污染,實(shí)驗(yàn)就必須停止,直到發(fā)現(xiàn)了污染源并清除污染為止,并且實(shí)驗(yàn)結(jié)果必須作廢。

2. 污染清除的驗(yàn)證: 
可從核酸提取開(kāi)始,按程序分步檢測(cè)15-20份純水樣本,觀(guān)察是否有陽(yáng)性反應(yīng)結(jié)果的出現(xiàn)。如有,則說(shuō)明實(shí)驗(yàn)室仍有污染存在,必須清潔至所有水樣本均檢測(cè)為陰性,實(shí)驗(yàn)室才可重新啟用。

 

總體來(lái)說(shuō),影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果大的因素也就是試劑、環(huán)境、設(shè)備、人員,其中人員具有大的可變性。結(jié)合對(duì)長(zhǎng)期以來(lái)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)整理和質(zhì)控圖的分析,多發(fā)現(xiàn)問(wèn)題,解決問(wèn)題,凡是好的我們肯定會(huì)繼續(xù)堅(jiān)持,不好的習(xí)慣堅(jiān)決摒棄,只有以認(rèn)真的工作態(tài)度、以謹(jǐn)慎的操作來(lái)完成每日的正常檢測(cè)實(shí)驗(yàn),杜絕或減少假陽(yáng)性的發(fā)生,才能保證血篩實(shí)驗(yàn)的正常開(kāi)展。


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